CP-0903不溶性微粒检查法第一法光阻法解读

摘要：CP-0903不溶性微微粒检查法是用以检查静脉用注射剂包括溶液型注射液、注射用无菌粉末、注射用浓溶液及供静脉注射用无菌原料药中不溶性微粒的大小及数量。本法包括第一法光阻法和第二法显微计数法。在对样品进行检查过程中当光阻法测定结果不符合规定或供试品不适于用光阻法测定时，应采用显微计数法进行测定，并以显微计数法的测定结果作为判定依据。本文主要以实验环境要求、光阻法仪器装置要求、操作方法要求、检查过程要求、结果判定、注意事项来对CP-0903不溶性微粒检查法第一法光阻法进行分析解读。

关键词：不溶性微粒 光阻法  A2000系列不溶性微粒仪 CP（中国药典） USP（美国药典）大体积 小容量  报告模版 

前言

不溶性微粒是2014年公布的药学名词，但是不溶性微粒早在19世纪70年代以被正式载入国家药典。注射液中的不溶性微粒主要会产生炎症反应、肉牙肿、栓塞、发热反应、过敏反应等，因此检查注射剂及注射用的无菌原料药中微粒的大小及数目非常有必要。中国药典从1985年版至1995年版均采用显微镜法检查注射液中的不溶性微粒，在2000年版的【中国药典】显微镜检查注射液中不溶性微粒的基础上增加了第二法光阻法，在2005年版【中国药典】中增加了对小剂量注射液的检测，并且在2005年版初稿中对注射液中不溶性1微粒污染的监控作了修订，将光阻法修订为第一法，显微镜法为第二法，修订后的结果判定也与美、英、欧共体、日本保持一致。到如今基本上所有的药典都规定了光阻法为第一法，显微计数法为第二法。

实验环境要求

实验操作所处环境应不得引人外来微粒，测定前的操作应在洁净工作台进行。玻璃仪器和其他所需的用品均应洁净、无微粒。本法所用微粒检查用水（或其他适宜溶剂），使用前须经不大于 1.0µm 的微孔滤膜滤过。

光阻法仪器装置要求

光阻法测定原理 当液体中的微粒通过一窄细检测通道时，与液体流向垂直的入射光，由于被微粒阻挡而减弱，因此由传感器输出的信号降低，这种信号变化与微粒的截面积大小相关。对仪器的一般要求 仪器通常包括取样器、传感器和数据处理器三部分。测量粒径范围为2～100μm，检测微粒浓度为0～10000个/ml。在此介绍一款匹配中国药典、美国药典要求的设备AccuSizer A2000系列不溶性微粒分析仪，A2000系列由进样器、融合光散法并可独立使用纯光阻法的LE-sensor传感器和适用于其它AccuSizer 系列设备的数据处理器这3部分组成。如下图：

AccuSizer A2000系列

A2000系列设备的进样器、LE传感器、数据处理器均为单独的模块化设计，简单方便可拆卸。A2000 系列进样器可搭配各种不同规格的注射器，并且在测试样品放置区配备磁力搅拌模块和样品升降台，很好的解决一些样品需要边搅拌边测试的问题，并且样品升降台的存在解放了使用者的双手，使测样操作更简单方便。A2000系列LE-Sensor传感器的既可以用纯光阻法进行样品测试又可以采用光阻加光散法增加其监测下限，使仪器使用的向多样化发展，LE-Sensor传感器最常见的配置为LE400-05型传感器，在纯光阻模式下的粒径检测范围为1.5~400um，在光散加光阻法模式下的粒径检测范围为0.5~400um，此外LE系列还有LE400-1(1~400um)、LE1000-2(2~1000um)、LE2500-5(5~2500um)、LE5000-50(50~5000um）等不同粒径检测范围的传感器。LE系列传感器使用的颗粒计数技术为SPOS单颗粒光学传感技术其检测微粒浓度为上限为10000个/mL刚好符合药典的需求。A2000系列的数据处理器可于AccuSizer系列的其它设备公用，可降低实验室采购该系列其它设备如大乳粒分析仪、多功能自动计数粒度仪等的成本。

关于检查用水及适宜溶剂背景要求

光阻法对于微粒检查用水（或其他适宜溶剂）需符合下列要求：取50ml测定，要求每10mL含10µm及10µm以上的不溶性微粒数应在10粒以下，含25µm及25µm以上的不溶性微粒数应在2 粒以下。（显微计数法取50ml测定，要求含10µm及10µm以上的不溶性微粒数应在20粒以下，含25µm及25µm以上的不溶性微粒数应在5 粒以下。）A2000系列关于背景检查的报告如下图：

不溶性微粒检查法检查过程要求

(1)标示装量为25ml或25ml以上的静脉用注射液或注射用浓溶液除另有规定外，取供试品至少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心翻转20次，使溶液混合均匀，立即小心开启容器，先倒出部分供试品溶液冲洗开启口及取样杯，再将供试品溶液倒入取样杯中，静置2分钟 或适当时间脱气泡，置于取样器上（或将供试品容器直接置于取样器上）。开启搅拌，使溶液混勻（避免气泡产生），每个供试品依法测定至少3次，每次取样应不少于5ml，记录数据，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

(2)标示装量为25ml以下的静脉用注射液或注射用浓溶液除另有规定外，取供试品至少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心翻转20次，使溶液混合均匀，静置2分钟或适当时间脱气泡，小心开启容器，直接将供试品容器置于取样器上，开启搅拌或以手缓缓转动，使溶液混匀（避免产生气泡），由仪器直接抽取适量溶液（以不吸入气泡为限），测定并记录数据，弃第一次测定数据，取续测定数据的平均值作为测定结果。

(1)、（2）项下的注射用浓溶液如黏度太大，不便直接测定时，可经适当稀释，依法测定。

也可采用适宜的方法，在洁净工作台小心合并至少4个供试品的内容物（使总体积不少于25ml)，置于取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气泡，置于取样器上。开启搅拌，使溶液混匀（避免气泡产生），依法测定至少4次，每次取样应不少于5ml。弃第一次测定数据，取后续3次测定数据的平均值作为测定结果，根据取样体积与每个容器的标示装置体积，计算每个容器所含的微粒数。

（3）静脉注射用无菌粉末除另有规定外，取供少4个，分别按下法测定：用水将容器外壁洗净，小心开启瓶盖，精密加人适量微粒检查用水（或适宜的溶剂），小心盖上瓶盖，缓缓振摇使内容物溶解，静置2分钟或适当时间脱气泡，小心开启容器，直接将供试品容器置于取样器上，开启搅拌或以手缓缓转动，使溶液混匀(避免气泡产生），由仪器直接抽取适量溶液（以不吸人气泡为限），测定并记录数据；弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

也可采用适宜的方法，取至少4个供试品，在洁净工作台上用水将容器外壁洗净，小心开启瓶盖，分别精密加人适量微粒检查用水（或适宜的溶剂），缓缓振摇使内容物溶解，小心合并容器中的溶液（使总体积不少于25ml)，置于取样杯中，静置2分钟或适当时间脱气泡，置于取样器上。开启搅拌，使溶液混匀（避免气泡产生），依法测定至少4次，每次取样应不少于5ml，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。

(4)供注射用无菌原料药按各品种项下规定，取供试品适量（相当于单个制剂的最大规格量)4份，分别置取样杯或适宜的容器中，照上述(3）法，自“精密加入适量微粒检查用水（或适宜的溶剂），缓缓振摇使内容物溶解”起，依法操作，测定并记录数据，弃第一次测定数据，取后续测定数据的平均值作为测定结果。